الیکٹروفورٹک پروسیسنگ کے معیار کیا ہیں؟

الیکٹروفورٹک پروسیسنگ کے معیار کیا ہیں؟

الیکٹروفورسس کا بنیادی اصول یہ ہے کہ یہ چارج شدہ ذرات کے برقی میدان کے عمل کے تحت منتقل ہونے کے عمل سے مراد ہے۔ بہت سے اہم حیاتیاتی مالیکیولز، جیسے امینو ایسڈز، پیپٹائڈس، پروٹینز، نیوکلیوٹائڈس، نیوکلک ایسڈز، وغیرہ میں ionizable گروپ ہوتے ہیں جو ایک مخصوص pH قدر پر مثبت یا منفی چارج لے سکتے ہیں۔ برقی میدان کے عمل کے تحت، یہ چارج شدہ مالیکیول اپنے چارج کی قطبیت کے مخالف الیکٹروڈ سمت کی طرف بڑھیں گے۔

الیکٹروفوریٹک مہارت برقی میدان کو استعمال کرتے ہوئے نمونوں کو الگ کرنے، تعین کرنے یا صاف کرنے کی صلاحیت ہے، جس کی وجہ سے چارج شدہ مالیکیول مختلف رفتار سے حرکت کرتے ہیں جس کی وجہ سے نمونے میں موجود مختلف مالیکیولز کی چارج شدہ خصوصیات میں فرق ہوتا ہے، نیز یہ فرق بھی ہوتا ہے۔ خود مالیکیولز کے سائز، شکل اور دیگر خصوصیات میں۔ الیکٹروفورسس کے عمل کو معاون میڈیم میں انجام دینے کی ضرورت ہے۔ مفت انٹرفیس الیکٹروفورسس جس کا انعقاد Tiselius et al. 1937 میں ایک فکسڈ سپورٹنگ میڈیم نہیں تھا، اس لیے بازی اور کنویکشن نسبتاً مضبوط تھے، جو علیحدگی کے اثر کو متاثر کرتے تھے۔ لہذا یہ ایک مقررہ معاون میڈیم کے ساتھ الیکٹروفورسس پیش کرتا ہے، جہاں نمونہ ایک مقررہ میڈیم میں الیکٹروفورسس کے عمل سے گزرتا ہے، جس سے بازی اور نقل و حمل کی مداخلت کم ہوتی ہے۔

ابتدائی معاون میڈیا فلٹر پیپر اور سیلولوز ایسٹیٹ میمبرین تھے، جو فی الحال لیبارٹریوں میں کم استعمال ہوتے ہیں۔ ایک طویل عرصے تک، چھوٹے مالیکیول مادوں جیسے امینو ایسڈز، پیپٹائڈس، شکر وغیرہ کو عام طور پر فلٹر پیپر یا سیلولوز یا سلیکا جیل کی پتلی تہہ والی پلیٹوں کو میڈیا کے طور پر استعمال کرتے ہوئے الیکٹروفورسس کے ذریعے الگ اور تجزیہ کیا جاتا تھا۔ تاہم، فی الحال، HPLC جیسی زیادہ فعال تکنیکوں کو عام طور پر تجزیہ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ یہ میڈیا سادہ اور آسان آپریشن کے ساتھ چھوٹے مالیکیول مادوں کو الگ کرنے کے لیے موزوں ہیں۔ تاہم، ناکارہ بائیو مالیکیولز کی علیحدگی کا اثر نسبتاً کم ہے۔ ایک معاون ذریعہ کے طور پر جیل کے تعارف نے الیکٹروفورسس کی مہارتوں کی نشوونما کو بہت فروغ دیا ہے، جس سے الیکٹروفورسس کی مہارتیں حیاتیاتی میکرو مالیکیولز جیسے کہ پروٹین اور نیوکلک ایسڈز کا تجزیہ کرنے کے لیے ایک اہم تکنیک بن گئی ہیں۔

الیکٹروفورٹک پروسیسنگ مشکل نہیں ہے، لیکن ہمیں یہ بھی جاننے کی ضرورت ہے کہ الیکٹروفورٹک پروسیسنگ کے لیے کچھ معیارات ہیں، ورنہ ہم نہیں جانتے کہ معیار اہل ہے یا نہیں۔ تو اس الیکٹروفورٹک پروسیسنگ کے معیار کیا ہیں؟

1. ہموار سطح

یہ ایک بنیادی شرط ہے، اگر سطح ہموار نہ ہو، تو بنیادی اہلیت ختم ہو جاتی ہے۔

2. یکساں موٹائی

الیکٹروفوریٹک پروسیسنگ کے لیے رنگ کے فرق کو ظاہر ہونے سے روکنے کے لیے یکساں موٹائی کو یقینی بنانے کی ضرورت ہوتی ہے۔

3. سطح پر کوئی واضح دراڑ نہیں ہے۔